Цель: разработка интеллектуальной системы предсказания метаболизма микробных консорциумов почв, предназначенной для автоматизации анализа хозяйственно полезных микроорганизмов почв и растений, а также выявления адаптационного потенциала микроорганизмов почвенных экосистем в условиях усиливающегося антропогенного воздействия.
Задачи:
Актуальность
Почвы сельскохозяйственного назначения являются национальным достоянием России, источником получения сельскохозяйственной продукции, сырья для некоторых отраслей промышленности. Растущее население земного шара (к 2030 г. – 8.5 млрд человек) требует рост производства продовольственных товаров в условиях сокращения посевной площади в расчете на одного человека (с 0.18 га до 0.15 га к 2050 году). Площадь нарушенных земель в Российской Федерации составляет 1 242,4 тыс. га и растёт. Перечисленные факты отражают актуальность задачи биоремедиации почв и повышения урожайности культур.
Кроме этого, в мире есть большое количество земель не пригодных к использованию в области сельского хозяйства, например, пустыни, степи, эрозионные почвы. Возможность ввода в эксплуатацию данных объектов также позволит существенно расширить посевную площадь и даст возможность изменить формат экономики целых стран.
Одним из подходов к решению проблемы восстановления загрязненных почв (при добыче нефти, предприятиями горнодобывающей промышленности и агропромышленного комплекса, в условиях военных действий), повышению их сельскохозяйственного потенциала, а также ввода в эксплуатацию земель, ранее не пригодных для сельского хозяйства является их фиторемедиация/ фитоподготовка с использованием специально разработанных микробно-растительных консорциумов.
Растительно-микробные ассоциации представляют собой надорганизменные системы, обладающие уникальными свойствами: они обеспечивают растения химическими соединениями, необходимыми для роста и развития, уничтожают патогены, вещества-загрязнители [Li et al., 2019] [Wu et al., 2019], в свою очередь получая пространство для роста, возможность перемещения и распространения вместе с частями растений, а в ряде случаев и защиту от внешних воздействий. Изучение биоразнообразия прикорневых микробных консорциумов (ризосфера) является перспективным направлением для сельского хозяйства, а также важно для биоремедиации антропогенно загрязненных экосистем/ подготовки новых почв к сельскохозяйственной эксплуатации. Растения и типы почв различаются по микробному составу, способствующему их росту и развитию.
Разработка
Коллективное поведение микробных экосистем является результатом многих взаимодействий между членами сообщества: обмен метаболитами, передача сигналов восприятия кворума, роста/торможения роста и смерти [Langille et al., 2013] [DiMucci et al., 2018]. Внутри одной и той же микробной популяции (как и между популяциями) существуют кооперативные и конкурентные отношения. Понимание межвидовых взаимодействий внутри микробных сообществ имеет решающее значение для выявления функций природных экосистем и создания синтетических консорциумов [Mainali et al., 2017]. Для исследования таких взаимодействий можно использовать системы с применением искусственного интеллекта. В литературе описаны примеры описания метаболических сетей микробных консорциумов с использованием подходов машинного обучения [DiMucci et al., 2018] [Chang et al., 2017]. Исследования микробных сообществ методами машинного обучения – активно развивающееся направление, имеющее колоссальный практический потенциал.
Для моделирования составов консорциумов (задел МГУ ) будет использован искусственный интеллект (задел МФТИ ), базирующийся на omics-данных. Следует отметить, что почва и ризосфера растений считаются одними из самых сложных объектов исследований . В данном проекте для получения omics-данных будет разработана стандартная технология проведения молекулярно-генетических исследований образцов почв и ризосферы растений, а именно: оптимизирован объём исследуемого образца и методика его отбора; разработан метод выделения и очистки нуклеиновых кислот (ДНК/ РНК) (на данный момент стандартные методы отсутствуют); разработан поход метатранскриптомики (RNA-seq) – для анализа метаболических путей только активных микроорганизмов (и потенциально активных – будут предложены методы активации); промежуточные продукты метаболизма будут исследованы с помощью метаболомных методов ЯМР (задел ФНКЦ ФХМ ФМБА России); для повышения качества и точности исследований ДНК/ РНК будет использоваться технология секвенирования Oxford Nanopore (задел МФТИ) . Для приготовления консорциумов будут использованы только природные штаммы микроорганизмов (возможно внесение в окружающую среду).
ПродуктБудет создана услуга: комплексная оценка, прогноз и разработка рекомендаций по направленной модификации биоценозов с целью достижения поставленных задач по ремедиации почв и улучшения плодородия сельскохозяйственных земель. В число задач, которые будут решены данном проекте, будут входить: улучшение/модификация почв перед посевом; модификация микробиома почвы с целью направленной регуляции его биокаталитической активности, направленной на увеличение синтеза фиторегуляторов и других необходимых биологически активных соединений, а также направленной на биоремедиацию почв, в том числе имеющих комбинированные варианты загрязнений (устранение загрязнений вокруг свалок, разливов канализации, нефтепродуктов, тяжелых металлов, антибиотиков и пр.). Для повышения эффективности действия, а также стабилизации состава модифицированных и сконструированных микробных ассоциаций/консорциумов в лабораторных и природных условиях будут разработаны экологически приемлемые иммобилизованные варианты биокаталитических микробных систем, позволяющие создавать и варьировать высокие концентрации клеток в составе популяций. Именно такие высококонцентрированные популяции клеток, функционирующие в режиме «кворумного ответа» обеспечивают биоценозы устойчиво функционирующими биологическими системами с расширенным спектром субстратов и метаболитов, в том числе в средах с высоким уровнем присутствия различных загрязнителей и средах с физико-химическими характеристиками (рН, концентрации солей, др.), отличными от благоприятных условий функционирования биоценозов.
Предсказательная модель метаболизма микробных консорциумов почв позволит в автоматическом режиме охарактеризовать адаптационный потенциал микроорганизмов загрязненных почв и предложить рекомендации по направленной модификации биоценозов с целью микробной ремедиации загрязненных почв. На основе полученных рекомендаций можно будет осуществлять биотехнологическую очистку загрязненных почв для улучшения плодородия сельскохозяйственных земель. Данные исследований почвенных биоценозов совместно с образцами ризосферы растений методами метагеномного, метатранскриптомного и метаболомного скрининга лягут в основу предсказательной модели метаболизма микробных консорциумов почв.
Участники проекта: МФТИ (НИУ), МГУ им. М.В. Ломоносова, ФНКЦ ФХМ ФМБА России, ПГНИУ